發(fā)布時(shí)間:2012-10-09 20:06:36
對于滅菌是否的檢查,還可使用生物指示劑發(fā)酵消泡劑生物進(jìn)行監(jiān)測,即利用一些已標(biāo)定的耐熱芽孢菌是否殺滅來直接指示滅菌是否。
(一)種子帶雜菌的檢查
接種用的種子,常需多次使用生物發(fā)酵消泡劑擴(kuò)大培養(yǎng),因此,對每級種子均加強(qiáng)檢查是非常必要的,可在每次接種后留下少量種子懸浮液進(jìn)行肉湯培養(yǎng)或平板劃線培養(yǎng),借以檢查是否種子帶菌。為了防止種子帶菌,必須注意保持無菌室、滅菌鍋和搖瓶的無菌狀態(tài)。
保存的菌種有時(shí)受螨入侵,由螨帶入雜菌,這點(diǎn)也應(yīng)注意。
(二)發(fā)酵設(shè)備和管件的染菌
這種染菌是指設(shè)備和管件,由于腐蝕或一些其它原因形成微小漏孔后發(fā)生的滲漏現(xiàn)象,如冷卻管的滲漏,管件的滲漏。還應(yīng)注意取消法蘭銜接部分溝槽,以隔膜閥代替球心閥等更為細(xì)小的死角,對設(shè)備和管件的要求越來越高。
(三)滅菌操作上的污染
分批滅菌中,采用生物發(fā)酵消泡劑罐壓1 kg/cm2,料溫120 C維持30 min的一般滅菌操作規(guī)范,是完全可以殺死任何微生物的,但是有時(shí)由于客觀上沒有達(dá)到這種狀態(tài),例如:
1.死角:明顯的設(shè)備死角易發(fā)現(xiàn),但諸如閥門處的一些不易察覺的死角往往忽視,應(yīng)加強(qiáng)對這類死角采取措施,如旁路閥門的應(yīng)用等等。
2.固形物的堆積:有些固形物特別是麩皮、黃豆餅一類粘著于罐壁、支架上,這些堆積物在滅菌過程中經(jīng)受干熱作用,它們由于受熱慢,堆積物里雜菌不易被殺滅。物料結(jié)塊,造成料內(nèi)滅菌不透。
消除發(fā)酵生物消泡劑培養(yǎng)基中固體物料所造成的不易滅菌的措施,是培養(yǎng)基的完全液化。例如,以淀粉酶、蛋白酶等進(jìn)行水解液化淀粉質(zhì)物料和餅粉類蛋白質(zhì)物料。利用pH指示聯(lián)動添加酸、堿,或利用葡萄糖自動調(diào)節(jié)發(fā)酵液的pH值,以便取代CaCO3作緩沖劑。
3.泡沫:操作不當(dāng),大量形成泡沫,泡沫中的空氣和泡沫的薄膜有隔熱作用,熱量不易穿透,潛伏的芽孢不易殺死,因此需使用生物發(fā)酵消泡劑進(jìn)行消泡。
(四)采用一些快速、準(zhǔn)確發(fā)現(xiàn)染菌的方法
目前利用酚紅肉 湯試驗(yàn)、鏡檢、培養(yǎng)等手段監(jiān)測微發(fā)酵生物消泡劑發(fā)酵是否染菌,有的因靈敏度不高,有的需時(shí)過長,有的憑器官感覺很難快速而準(zhǔn)確地做出判斷,延誤了對染菌罐及時(shí)做出處理。有時(shí)幾種監(jiān)測手段得到的結(jié)果不一致,難以做出定奪。因此,快速、準(zhǔn)確發(fā)現(xiàn)染菌更顯得重要。
1.溶解氧水平:溶解氧水平異??捎米鞴烙?jì)發(fā)酵是否感染細(xì)。菌、噬菌體的依據(jù)。
2.發(fā)酵液pH值:某些雜菌在生長繁殖過程中產(chǎn)酸,使發(fā)酵液的pH值異常,因此,可利用發(fā)酵過程中pH的變化情況,作為染菌的依據(jù)之一。
3.排氣組分:當(dāng)發(fā)酵污染雜菌時(shí),排氣組分常有變化,利用這類異?,F(xiàn)象,也可作為早期判定發(fā)酵染菌的依據(jù)。
4.發(fā)酵過程中酶的變化:利用某些雜菌能產(chǎn)生特異的酶,以快速測定早期是否染菌。
本文參考《發(fā)酵微生物學(xué)》一書。
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